1、利用dnastar快速筛选重复序列步骤如下:打开NCBI,搜索基因。找到该序列的CDS序列,输入到序列的标准格式的文件中,点击CDS序列,复制该序列即可,输入到标准的SEQ格式中。
1、原位杂交探针的制备如下:原位杂交探针长度是100-400nt。用于原位杂交的探针可以是单链或双链DNA,也可以是RNA探针。通常探针操作的长度以100-400nt为宜,过长则杂交率减低。
2、杂交后处理 杂交完,以后的步骤不必要特意防RNA酶。弃去杂交液,载片浸入2xSSC中2×15 min。载片浸入1xSSC中55℃水浴摇动2×15 min。用含20mg/mL的RNaseA的NTE缓冲液37℃消化30分钟,以去除未结合的探针。
3、你要检测的片段你一定知道吧?让试剂公司给你合成就行啦!要是当做一个问题回答的话就更简单啦!把你要检测的片段用DnaseⅠ进行部分酶切,然后在用带有标记的dNTP进行DNA合成补齐缺口,这样带有标记的探针就合成了。
4、(2)组织与细胞的固定进行原位杂交的细胞或组织必须经过固定处理,常使用4%的多聚甲醛(3)探针对探针的设计与 *** 根据被测定的核苷酸序列来决定。
测序结果拼接其实很简单,你看你的两个测序结果的后面应该有一段重叠区(如果测通的话),通过重叠区拼接起来就可以了。DNAman里可以自动拼接的。你说的那几个软件在百度文档里就有下载。
双向测序得到的两个序列如果有重叠区的话,那么可以做拼接。另外NCBI的blastn可以做两个序列的比较,通过blastn比较可以看两个序列有没有重叠序列。
打开.SEQ文件,可以使用DNASTAR Lasergene或View with a text editor软件打开。DNASTAR Lasergen是全面的生物医学软件,用作DNA和蛋白质序列分析、重叠群拼接和基因工程管理。
一段序列测序后,得到两个ab1文件,用Seqman进行序列拼接时发现,两条序列方向一致,怎样将其中一条弄成反向的。并且不丢失峰图。